研究报告

菠萝体细胞胚酵母单杂交 cDNA文库及AcSERK1 启动子相关诱饵载体 的构建  

栾爱萍1,2 , 何业华2* , 谢桃2
1中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,海口, 571101; 2华南农业大学园艺学院,广州, 510642
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 17 篇   
收稿日期: 2019年12月21日    接受日期: 2019年12月27日    发表日期: 2021年04月07日
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摘要

为筛选与菠萝AcSERK1 启动子中胚性细胞特异性表达调控区段(-983~-881 nt)的结合蛋白,本研究利用 MatchmakerTM Gold Yeast One-Hybrid System构建菠萝体细胞胚酵母单杂交 cDNA文库以及胚性细胞特异性表达调控区段(SE103)的诱饵载体。建立的菠萝体细胞胚酵母单杂交 cDNA文库库容量为 1.25×107 CFU,其插入片段平均长度约 1.5 kb,重组率为 100%。通过检测,AbA最低浓度为 600 ng/mL时,构建的诱饵载体 pAbAi-SE103Y1HGold酵母菌株中的自激活活性被有效抑制,表明该菠萝体细胞胚酵母单杂交 cDNA文库以及诱饵酵母菌株 Y1HGold (pAbAi-SE103),可用于AcSRKE1 启动子中胚性细胞特异性表达调控区段互作蛋白的筛选实验,为胚性细胞特异性转录因子的分离鉴定提供数据参考。

关键词
菠萝(Ananas comosus);AcSERK1;体细胞胚;酵母单杂交

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